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纪宁课堂 :关于培养基和灭菌的操作以及过程!

来源:未知     时间:2020-03-23 08:44     浏览次数:

1.调理 pH 值
 
用pH试纸(或 pH 电位计、氢离子浓度比色计)检验培养基的pH值,如不符合需求,可用10%HCl或10%进行调理, 直到调理到配方要求的pH值停止。
   
2.分装
    
已过滤的培养基应进行分装。 如果要制作斜面培养基, 须将培养基分装于试管中。如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基, 则须将培养基分装于锥形瓶内。
 
3.过滤
 
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时, zui好折叠成六层, 用滤纸过滤时, 可将滤纸折叠成瓦棱形, 铺在漏斗上过滤。
 
4.制作溶液
    
向容器内参加所需水量的一部分, 按照培养基的配方, 称取各种材料, 顺次参加使其溶解, zui终补足所需水分,对蛋白胨、肉膏等物质, 需加热溶解, 加热进程所蒸腾的水分, 应在悉数材料溶解后加水补足。
 
5.制作斜面培养基和平板培养基
 
培养基灭菌后, 如制作斜面培养基和平板培养基, 须趁培养基未凝聚时进行。
 
(1)制作斜面培养基。在试验台上放 1 支长 0.5~1 米左右的木条, 厚度为 1 厘米左右,将试管头部枕在木条上, 使管内培养基天然歪斜, 凝聚后即成斜面培养基。
 
(2)制作平板培养基。将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在试验台上, 点燃酒精灯, 右手托起锥形瓶瓶底, 左手拔下棉塞, 将瓶口在酒精灯上稍加灼烧, 左手翻开培养皿盖, 右手敏捷将培养基倒入培养皿中, 每皿约倒入 10 毫升, 以铺满皿底为度. 铺放培养基后放置 15 分钟左右, 待培养基凝聚后, 再 5 个培养皿一叠, 倒置过来, 平放在恒温箱里,24 小时后查看, 如培养基末长杂菌,即可用来培养微生物。
 
6.加棉塞
 
分装完毕后, 需求用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的首要目的是过滤空气, 防止污染. 棉塞应选用普通新鲜、枯燥的棉花制作, 不要用脱脂棉, 防止因脱脂棉吸水使棉塞无法运用。