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纪宁生物小鼠视网膜微血管周细胞简介

纪宁生物小鼠视网膜微血管周细胞简介如下:

基本信息
产品名称 :小鼠视网膜微血管周细胞
产品品牌 :纪宁生物
组织来源 :视网膜组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
小鼠视网膜微血管周细胞分离自视网膜组织。视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。


视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用。后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处最多。第二层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。


视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力最强。它是组成血管腔面单层扁平上皮样细胞,它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用,在视网膜血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。


周细胞(pericyte) 又称R ouget细胞和壁细胞,是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞,可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中,通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯,监视和稳定内皮细胞的成熟过程。此外,周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用,其多功能性是目前研究的热点之一,所以对血管周细胞的生物学特征、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料。


周细胞产生手指状的外延以调控毛细血管的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜,基膜上有多种细胞连接,包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与毛细血管直径的双向调控。毛细血管受损时,周细胞还可增殖,分化为内皮细胞和成纤维细胞。

方法简介
纪宁生物实验室分离的小鼠视网膜微血管周细胞采用中性蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
纪宁生物实验室分离的小鼠视网膜微血管周细胞经α-SM A 免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培  养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每3-4天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :成纤维细胞样
传代特性 :可传1-2代左右
传代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相:空气,95% 。C O2,5%
小鼠视网膜微血管周细胞体外培养周期有限。建议使用纪宁生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
小鼠视网膜微血管周细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在纪宁生物技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代左右。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液,1000rpm ,离心5min,保留沉淀。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液0. 5m L至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min (或4℃冰箱静置5-7min) 。消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化。
3) 经1000rpm ,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1% FBS,促进贴壁) 重悬沉淀,接种于新的培养瓶内。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热) 。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和纪宁生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们纪宁联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
上海纪宁生物一直致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供的小鼠视网膜微血管周细胞科研试剂和完善的技术服务,满足生物化学、分子生物学、细胞生物学、免疫学等生物科技实验需求。
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