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65-46-3 / 胞苷生产工艺介绍

胞苷是人体和动植物体内RNA的结构片段,在生物体内生理生化过程中起着重要的调控作用,具有多方面生理活性;同时胞苷又是很多抗病毒、抗肿瘤和抗艾滋病药的良好中间体以及基因工程研究的重要原材料。目前国内外制备胞苷的主要方法是化学合成法,即以胞嘧啶和核糖或者以尿苷为主要原料进行制备,但存在反应步骤多,反应条件苛刻,操作繁琐,环境污染较大和原料成本高的问题。》胞苷又名胞嘧啶核苷,在医药方面和食品工业中应用十分广泛。本文对胞苷的提取方法主要采用发酵法。并以枯草芽孢杆菌为例,简述了发酵提纯的基本步骤,对其进行紫外光诱变及筛选。

无色或白色结晶,或结晶性粉末。有特殊气味。相对分子质量367.17。熔点260℃(分解)。不溶于乙醇,溶于水。

分子式:

胞苷生产工艺介绍

胞苷是人体和动植物体内RNA的结构组成部分,在生物体内生理生化过程中起着重要的调节作用,具有多方面生理活性;同时,胞苷又是很多抗病毒、抗肿瘤和抗艾滋病药物的良好原材料。其核苷衍生物,可改善头部外伤后或脑手术后意识障碍的意识状态及脑电图,促进脑卒中偏瘫病人的上肢运动功能的恢复,对促进大脑功能恢复、促进苏醒有一定作用。促进卵磷脂生物合成和抗磷脂酶A作用。与蛋白分解酶抑制剂合用,可保护及修复胰腺组织。目前对于胞苷的合成方法很多,主要是化学方法。可以利用微生物发酵法生产,具有低成本、产率高等有点。随着人类的发展,对天然嘧啶核苷的需求量逐渐加大,于是,发酵法生产胞苷的研究也日益得到更广泛的重视。而发酵发采用选育技术获得的菌株能够大规模且单一地生产胞苷。这对我国在胞苷的市场有着重大的意义。

胞苷最新的用途

①治疗眼科疾病:用胞二磷胆碱配合遮盖治疗大龄弱视1-3个疗程。80%单只眼视力可提高两行以上,采用胞二磷胆碱联合物理综合疗法治疗弱视。其作用机制可能是通过延长或重建人视觉敏感期。降低细胞功能阚,提高细胞活性,减少中枢对弱视眼的抑制等方面来起到提高视力的作用;

②治疗精神疾病:甩胞二磷胆碱治疗阴性症状精神分裂症闭或联合丹参注射液等治疗抑郁症,均取得了一定疗效,其作用机制是胞二磷胆碱能增强脑干网状结构上行激活系统的功能,改善脑血管张力,提高神经系统的代谢与功能。

③刺加穴位注射治疗重症周围性面瘫吨:采取针利透穴加穴位注射胞二磷胆碱、维生素、利多卡因等药物,有效可达90%以上。穴位注射胞二磷胆碱有效地增加了面神经的营养,使面瘫得以营养。

④治疗新生儿缺氧性脑病:可提高治愈好转率,减少病死率,对轻度新生儿缺氧性脑病的治疗预后较好,对中度者其后遗症发生率明显降低,但重度折预后不良。

胞苷的提取分离方法

可以从发酵液中提取胞苷二磷酸胆碱,也可以采用传统的方法,从RNA中经过化学方法水解,然后制备2中嘧啶核苷,这不仅仅需要大量的优质RNA原料,而且2种嘧啶核苷及两种嘧啶核苷都必须产销平衡,否则成本很高。所以采用发酵液中提取。

1直接发酵法

直接借助微生物具有合成自身所需要核苷的能力,通过对特定微生物的诱变处理,选育出营养缺陷型及核苷类似物抗性突变株。以接触代谢调节中的反馈机制和反馈阻遏,从而达到目的。从而产生大量优质的胞苷。

2通过基因重组技术构建胞苷生产菌进行发酵生产

可以利用基因重组,将可以产生核苷生产菌的相关基因导入简单易操作的菌种中,对其进行培养,最终利用从发酵液中提取的方法获得大量胞苷。经过传统诱变得到的菌株会产生大量次级突变,具有菌体生长速度慢等弱点,是目前工业生产中难以解决的问题。基因工程技术改造菌株,如基因克隆、基因敲除等,因其无次级突变、改造目的性强、实验周期短等优势逐渐受到人们的重视。

对胞嘧啶核苷的纯化 

可利用711(cl-)型阴离子交换树脂柱层析分离。711离子交换树脂cl-型柱(20-50目),柱高60厘米,直径3厘米,流速每分钟每平方厘米2毫升左右。可根据鉴定出样液的成分推算出胞苷的峰值,得到纯化。