当前位置: 首页 > CAS号数据库 > 28983-56-4 > 28983-56-4 / 苯胺蓝(水溶)的应用

手机扫码访问本站

微信咨询

28983-56-4 / 苯胺蓝(水溶)的应用

概述[1]

苯胺蓝(水溶)(AinlinblueW.5.,AnB)曾用作酸碱指示剂,在生物学和医学中用作神经组织、细胞质等的染色剂川,未见用作分析试剂的报道。试验发现,在pH2.1的Brit-otoRoibnson缓冲介质存在的苯胺蓝(水溶)溶液中加人BSA,溶液发生减色效应。可以作为蛋白质的吸光探针。在最佳反应条件下,苯胺蓝(水溶)溶液的最大吸收峰在600nm,苯胺蓝(水溶)与BSA相互作用形成复合物后,溶液发生减色,其最大吸收峰仍在600nm波长处,以试剂空白为参比时,在600nm波长处形成一波谷,在678nm波长处形成一波峰,波峰和波谷的吸光度绝对值均与BSA的浓度呈良好的线性关系,可用于蛋白质的定量测定。

苯胺蓝(水溶)的应用

应用[3]

苯胺蓝(水溶)荧光染色法观察匍匐翦股颖叶片组织

S1、进行药品的配制;

S11、将福尔马林10ml、乙酸3ml、50%的乙醇87ml、5ml甘油混合均匀,得FAA固定液;

S12、将无水乙醇与二甲苯以1:1的比例混合配制成1/2二甲苯;

S13、称取0.1g苯胺蓝(水溶)溶解于100ml浓度为0.07mol/L,pH=7的磷酸缓冲液中,得0.1%的苯胺蓝(水溶)荧光染色剂。

S2、制作石蜡切片;

S21、用锋利的刀片快速取下宽度约0.8mm的匍匐剪股颖叶片,将叶片切割成长度约5mm左右小段,放入青霉素小瓶中,加入步骤S11所得的FAA固定液,固定12h;

S22、经FAA固定后,依次置换15%、30%、50%、70%、85%乙醇中进行梯度脱水,各脱水20min,于95%乙醇中脱水30mim,无水乙醇中脱水两次,各20min;然后依次置换1/2二甲苯、二甲苯进行透明,于1/2二甲苯中透明1h,二甲苯中透明两次,每次30min,至材料完全透明为止;

S23、在装有所得透明材料的青霉素小瓶中加碎蜡两次,第一次加入与瓶中二甲苯等量的碎蜡,放入电热鼓风干燥箱中温度36℃保持1h至所加碎蜡完全融化后,加入瓶中液体一半的碎蜡,放入电热鼓风干燥箱中调节温度至36℃过夜后,调节温度至42℃,置换50%石蜡保持1h后,温度调至50℃,置换75%的石蜡保持30min后,调节温度至60℃,依次置换纯石蜡A、纯石蜡B、纯石蜡C各30min,然后采用TKY-BMB型石蜡包埋机进行包埋,一个蜡块中一个材料,蜡块的尺寸为:0.5cm×0.5cm×0.5cm,将包埋好的蜡块冷却后直接修块,进行切片或保存到4℃冰箱备用;

S24、采用轮式手动切片机进行连续切片,厚度10μm;将HH-6数显恒温水浴锅温度调节至45℃,在500ml大烧杯加入蒸馏水放入水浴锅中,将切好的蜡带放入烧杯中,待蜡带完全展开后,将涂抹好蛋清甘油的载玻片伸入烧杯中,使蜡带粘到载玻片上,将粘有蜡带的载玻片自然晾干后,在光学显微镜下观察展片效果,取展片效果好的片子置于电热鼓风干燥箱中于38℃下烘烤,直到片子完全干燥;

S25、取干燥的片子,依次放到分别加有二甲苯、1/2二甲苯、95%的乙醇、85%的乙醇、70%的乙醇、50%的乙醇、30%的乙醇、磷酸缓冲液、0.1%的苯胺蓝染色剂的立式染缸中;在二甲苯、1/2二甲苯中各5min,95%的乙醇、85%的乙醇、70%的乙醇、50%的乙醇、30%的乙醇中各5S,磷酸缓冲液中10min,0.1%的苯胺蓝(水溶)染色剂中30min;然后将染色后的片子取出,置于蒸馏水中30S,洗净片子上的杂质后,过1/2二甲苯、二甲苯各10S,待片子干燥后采用中性树胶封片;

S26、将所得的片子自然风干后,置于LeiCaDM6000B荧光显微镜下观察并拍照。

主要参考资料

[1] 黎雪莲, 袁若, 柴雅琴, 张凌燕, 王娜, & 朱强. (2006). 基于静电吸附甲苯胺蓝和纳米金固定过氧化物酶生物传感器的研究. 分析化学, 34(3), 389-392.

[2] 肖锡林, 王永生, 李贵荣, & 吕昌银. (2004). 甲苯胺蓝共振光散射法测定纳克级脱氧核糖核酸. 光谱学与光谱分析, 24(2), 190-193.

[3] 赵香汝, 王家鑫, & 崔平. (2000). 肥大细胞用甲苯胺蓝染色之体会. 中国组织化学与细胞化学杂志, 9(3), 359-359.