亲和纯化抗体洗脱浓缩试剂盒

1. 将偶联好抗原或抗体的填料或琼脂糖凝胶放入5-10 ml纯化柱中，弃去保存液。
2. 纯化柱中加入10 ml预洗脱液洗脱一次，弃去流穿液。
3. 纯化柱中加入10 ml洗脱液，得到的流穿液即为抗体。弃去前3 ml流穿液，后面7 ml分成7管，每管接1 ml流穿液，抗体收集管中预先加入50 ul收集液。
4. ELISA检测7管抗体的效价，保留效价最高的2-3 ml抗体。
5. 效价较低的抗体可以进行浓缩。将保留的抗体加入超滤管中，4℃离心，水平离心机转速4000 g，如果是角转离心机转速5000 g，离心15-60 min。时间需根据超滤管中甩下的液体来控制，滤膜以上和以下液体的体积比可估算浓缩的倍数。
6. 滤膜以上液体即为抗体，为了更多的收集抗体，离心后直接将超滤管垂直放入超声清洗器中，超声20 min。如果没有超声清洗器，可以用移液器吹打滤膜以上液体。
7. 抗体长期保存可加入40%甘油和0.05%叠氮钠，-20℃~-80℃保存。