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HSF​人皮肤成纤维细胞

品牌:纪宁生物

货号:JN24027

规格:

联系方式:021-66980655

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产品详情

HSF人皮肤成纤维细胞
细胞特性
来源:人
形态:贴壁生长 
含量:>lxl06 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 
规格:T25瓶或者 lmL 冻存管包装

细胞接受后的处理:
收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将 T25瓶置于 37°C 培养约 2-3h〇弃去 T25瓶中的培养基,添加 6ml 本公司附带的完全培养基。如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用 6ml 本公司附 带的完全培养基。接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

细胞用途:仅供科研使用。
本公司的细胞培养操作规程,供参考培养基及培养冻存条件准备:准备 DMEM 培养基(DMEM,GIBCO,货号 11965-092),85%;北美胎牛血清(UnitedStates,GIBCO,货号 16000-044),15%。培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37°C,培养箱湿度 为 70%-80%。冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

细胞处理:
复苏细胞:将含有 lmL 细胞悬液的冻存管迅速放入 37°C 水浴中(水面要低于 冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有 4mL 培养基的 15ml 离心管中混合均匀。在1000RPM 条件下离心 4分钟,弃去上清液,加入 lmL 培养基后吹匀。 然后将所有细胞悬液移入含有 5ml 培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检 查细胞密度。 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

HSF人皮肤成纤维细胞

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2次。加 2m 丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于 37°C 培养箱中 消化 1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入 3ml 此细胞的培养基终止消化。轻轻吹打后吸出,移入15ml 离心管中,在 1000RPM 条件下离心 4分钟,弃去 上清液,加入 lmL 培养液后吹匀。移入到事先准备好的含有 5ml 培养基的 T-25培养瓶中或含有 14ml 培养基的 T-75培养瓶中培养。

细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的 1-3步骤进行,最后的重悬液使用血清。加 DMSO 至最终浓度为 10%。加入 DMSO 后迅速混匀,按每 lml 的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于 1X106个细胞冻存。

注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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