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LNCaP​人前列腺癌细胞

品牌:纪宁生物

货号:JN24030

规格:

联系方式:021-66980655

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产品详情

LNCaP人前列腺癌细胞
细胞介绍
人前列腺癌细胞 LNCaP 克隆 FGC 是从一位 50岁白人男性(血型 B+)的左锁骨淋巴 结针刺活检中分离,该患者经确诊为前列腺癌转移。这株细胞对 5-ct-二氢睾酮(生 长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。这株细胞并不形成一致的单层,而是形成集落,在传代时可以用滴管反复吹吸打碎。

它们仅仅轻轻地吸附在基底上,不形成汇合,很快使培养基变酸。生长很慢,传代后 48小时内不应扰动。当培养瓶封包后,多数细胞从培养瓶底分离,悬浮在培养基中。收到后,在通常培养单 层细胞的条件下培养 24到 48小时,以使细胞再贴壁。此后可以换上新鲜培养液。 如果需要,培养瓶内容物可以收集,300g 离心 15分钟,以 10毫升培养液重悬并培养到一个单独的培养瓶中。请使用Coming 的 Cellbind 培养瓶培养。

细胞特性
1) 来源:前列腺;左锁骨淋巴结癌转移灶
2) 形态:上皮细胞样
3) 含量:>lxl06 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T25瓶或者 lmL 冻存管包装

运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
1) 培养基及培养冻存条件准备:
1. 准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,货号 31800022,添加 NaHC031.5g/L, D-葡萄糖 2.5g 八,丙酮酸钠 O.llg 八),90%;优质胎牛血清,10%。
2. 培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3. 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

2) 细胞处理:
复苏细胞:将含有 lmL 细胞悬液的冻存管在 37°C 水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4分钟,弃去上清液,补 加 l-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将 细胞悬液加入 l〇cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

LNCaP人前列腺癌细胞

细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。对于贴壁细胞,传代可参考以下方法: 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2次。力口 2m 丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于 37°C 培 养箱中消化 1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部 分变 圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止 消化。按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4分 钟,弃 去上清液,补加 l-2mL 培养液后吹匀。将细胞悬液按 1: 2到 1: 5的比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 


细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约 lml 含血清的培养基后 加入冻存管中,再添加 1〇%DMSO 后进行冻存。

注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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