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基本信息
产品名称 ：小鼠卵巢成纤维细胞
产品品牌 ：纪宁生物
组织来源 ：卵巢组织
产品规格 ：5×105cells/T25细胞培养瓶
细胞简介
小鼠卵巢成纤维细胞分离自卵巢组织。卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育(右侧已退化) ，呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。
卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成。髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。
成纤维细胞(Fibroblast) 是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化。
成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的卵巢成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起。6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团。细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。卵巢成 纤维细胞大多分布于卵巢表面，
其主要特点和功能
① 成纤维细胞在体外易于培养。
② 卵巢损伤后，成纤维细胞能修复和重塑卵巢。
③ 能在卵巢炎症时有效控制炎症扩散。
方法简介
纪宁生物实验室分离的小鼠卵巢成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
纪宁生物实验室分离的小鼠卵巢成纤维细胞经Vim entin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 ：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 ：每2-3天换液一次
生长特性 ：贴壁
细胞形态 ：成纤维细胞样
传代特性 ：可传3代左右
传代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 ：气相 ：空气，95% 。C O2，5%
小鼠卵巢成纤维细胞体外培养周期有限。建议使用纪宁生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
小鼠卵巢成纤维细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈成纤维细胞样，在纪宁生物技术部标准操作流程下，细胞可传3代左右。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作
1. 取出T 25细胞培养瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 悬浮细胞处理
1) 收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中，用PBS清洗细胞培养瓶1-2次，收集清洗液。
2) 1200-1500rpm 离心3min，弃上清，收集细胞沉淀。
3) 加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞。将分散好的细胞调整合适
密度接种至培养器皿中，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 若遇到悬浮细胞团块较大，无法机械吹散时，向步骤2) 中细胞沉淀添加0. 25% 胰蛋白酶消化液2m L至离心管中，用吸-管轻轻吹打混匀，37℃温浴2-3min，消化结束后，加入胰酶抑制剂(或血清) 终止消化，用吸管轻轻吹打，分散细胞。1200rpm 离心5min，弃上清，收集细胞沉淀。
5) 加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀。按传代比例进行接种传代，然后补充
新鲜的完全培养基至5m L，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
6)待细胞状态稳定后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
小鼠卵巢成纤维细胞
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和纪宁生物技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们纪宁系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
