大鼠皮肤肥大细胞

品牌：纪宁生物

货号：JN25235

规格： 5×10⁵Cells

联系方式：021-66980655

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产品详情

大鼠皮肤肥大细胞
基本信息
产品名称：大鼠皮肤肥大细胞
产品品牌：纪宁生物
组织来源：皮肤组织
产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介

大鼠皮肤肥大细胞分离自皮肤组织。皮肤肥大细胞广泛分布于皮肤微血管周围，分泌多种细胞因子，参与免疫调节(T 细胞、B细胞、A PC 细胞活化) 。皮肤肥大细胞表达M HC分子、B 7分子，具有A PC 功能。表达大量的IgE -Fc受体，释放过敏介质。具有弱吞噬功能，和血液的嗜碱粒细胞同样，具有强嗜碱性颗粒的组织细胞。存在于血液中的这类颗粒，含有肝素、组织胺、5-羟色胺，由细胞崩解释放出颗粒以及颗粒中的物质，可在组织内引起速发型过敏反应(炎症) 。

由于在肥大细胞上结合的IgE抗体和抗原的接触，使细胞多陷于崩坏。肥大细胞呈圆形或卵圆形，细胞核小，呈圆形或椭圆形，染色浅，位于细胞中央细胞常成堆或单个分布于血管附近。细胞呈圆形或卵圆形，细胞质中充满大小一致、染成蓝紫色的颗粒，均匀分布在核周围。

方法简介

纪宁生物实验室分离的大鼠皮肤肥大细胞采用胶原酶-胰蛋白酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测

纪宁生物实验室分离的大鼠皮肤肥大细胞经M C G -35免疫荧光鉴定，纯度可达90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：悬浮细胞形态圆形
传代特性：属于终末分化细胞。属于不增殖细胞群
传代比例：不传代
消化液：0. 25% 胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95% 。C O2，5%
大鼠皮肤肥大细胞体外培养周期有限。建议使用纪宁生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片

使用方法

大鼠皮肤肥大细胞是一种悬浮细胞，细胞形态呈圆形，在纪宁生物技术部标准操作流程下，细胞属于终末分化细胞。属于不增殖细胞群。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作

1. 取出T 25细胞培养瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 静置后，显微镜下观察细胞状态，拍照记录细胞的贴壁情况，漂浮的细胞需离心收集后在离心管消化(脱落细胞处理方式) ，贴壁细胞也需消化后与脱落的细胞合并一起后重新接种。
3. 神经元细胞消化
1) 将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管，离心收集细胞(1200rpm5min) ，细胞沉淀按照下面脱落细胞处理方式处理该部分细胞。
2) 培养瓶内贴壁细胞，用PBS(37℃预热) 清洗细胞一次，将PBS收集到步骤1的离心管中，不要直接丢弃。
3) 添加0. 125% 胰蛋白酶消化液(0. 25% 胰酶用PBS稀释一倍) 1m L至培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，放入4℃冰箱消化细胞3-5min(或者37℃温浴1min ) 。
4) 倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化(稀释法终止消
化，培养基用量不低于5ml) 。
5) 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞，1200rpm 5min 离心去除残留胰酶。
6) 去掉上清，加入适量的完全培养基混匀(可补加1% FB S，促进贴壁) ，接种于孔板中(提前多聚赖氨酸包被孔板) 。
7) 待细胞贴壁后可用于后续相关实验。
4. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液，1200rpm 5min离心，保留沉淀。
2) 添加0. 125% 胰蛋白酶消化液(0. 25% 胰酶用PBS稀释一倍) 1m L至离心管中，轻柔重悬沉淀，放置4℃冰箱静置3-5min ) 。
3) 消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化。
4) 经1200rpm ，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(可补加1% FBS，促进贴壁) 重悬沉淀，接种于新的培养瓶内。
5) 接种后绝对静置24-48小时， 48小时后观察，否则细胞容易聚团。
5. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ （2-5μg/cm2），多聚赖氨酸PLL（0. 1m g/ml），明胶（0. 1% ），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

大鼠皮肤肥大细胞

注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和纪宁生物技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们纪宁系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

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