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大鼠神经少突胶质前体细胞

品牌:纪宁生物

货号:JN25610

规格: 5×10⁵Cells

联系方式:021-66980655

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产品详情

大鼠神经少突胶质前体细胞
基本信息
产品名称 : 大鼠神经少突胶质前体细胞
产品品牌 : 纪宁生物
组织来源 : 脑组织
产品规格 : 5×105cells/T25细胞培养瓶


细胞简介  

大鼠神经少突胶质前体细胞分离自脑皮层组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。少突胶质细胞分布于中枢神经系统,在银浸染标本中,少突胶质细胞比星状胶质细胞小,其突起也较小而少,呈珠状,故被称为少突胶质细胞或寡突胶质细胞。

少突胶质细胞(oligodendrocyte)是中枢神经系统(C N S)的成髓鞘神经胶质细胞,其发育要经历少突胶质细胞祖细胞、前少突胶质细胞祖细胞、未成熟和成熟少突胶质细胞等阶段。有学者将少突胶质细胞按其发育程度和形态分为三型。但是,细胞发育是一个连续的过程,其形态、表达产物和功能的演变没有严格的界限,因此,其分类是相对的。

这三型分别为:Ⅰ型少突胶质细胞又称前O 2A (pre-O 2A p ro genitorcell)。细胞呈圆形,表面光滑,直径约3μm,体外混合培养时成簇生长在星形胶质表面,具有很强的分裂增殖潜力,表达神经节苷脂GM 1、波形蛋白和多唾液酸—神经粘附分子(polysialic acid -neuralcellad h esionmolecule,P SA-NCAM )等。

Ⅱ型少突胶质细胞胞体常有双极或三极突起,极少数为单极突起,直径约7μm ,有一定的分裂增殖能力。体外培养时为双潜能细胞,既可分化为少突胶质细胞又可分化为Ⅱ型星形胶质,故又称为少突胶质细胞-Ⅱ型星形胶质祖细胞(oligo d en d ro cyte-typ e-2astro cyte p ro genitorcell,O 2A)。O 2A除表达G M 1和波形蛋白外还表达神经节苷脂G D 3和G Q(淋巴杂交瘤株A 2B5产生G Q 的抗体),故常用A 2B5抗体标记O 2A 。

Ⅲ型少突胶质细胞不再具有分裂增殖能力,为分裂终期细胞。直径约10μm 。根据其形成髓鞘的能力,又分为不成熟的和成熟的两类少突胶质细胞。不成熟的O L胞体常伸出4~5条较粗大突起,表面还残留有A 2B5标记物,同时也表达O 1-O 4抗原,无形成髓鞘的能力。成熟的少突胶质细胞突起有如蜘蛛网,大量表达半乳糖脑苷脂(galactocerebro side,G C )、蛋白脂蛋白(proteiolipidprotein,PLP)、髓鞘碱性蛋白(m yelin basic protein,M BP)等,有对轴突髓鞘化的能力。体外培养的少突胶质细胞前体细胞(简称少突胶质细胞前体细胞)包括前O 2A 和O 2A 和未成熟少突胶质细胞,前两者具有增殖能力。


方法简介

纪宁生物实验室分离的大鼠神经少突胶质细胞采用胰蛋白酶消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。


质量检测

纪宁生物实验室分离的大鼠神经少突胶质前体细胞经A2B5免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。


培养信息

包被条件 : PLL(0.1m g/ml)
培 养 基 : 含B-27、PD G F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 : 每2-3天换液一次
生长特性 : 贴壁 
细胞形态 : 双极、多极形
传代特性 : 不传代,不增殖,存活1-2周
传代比例 : 不传代
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培养条件 : 气相:空气,95% ;C O2,5%
大鼠神经少突胶质前体细胞体外培养周期有限;建议使用纪宁生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。


细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片


使用方法

大鼠神经少突胶质前体细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈双极、多极形,在纪宁生物技术部标准操作流程下,细胞不传代,不增殖,存活1-2周;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。


客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作

1.取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2.贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1m g/m l),明胶(0.1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。


大鼠神经少突胶质前体细胞

注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和纪宁生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们纪宁系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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