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大鼠胚胎肢芽间充质干细胞

品牌:纪宁生物

货号:JN25620

规格: 5×10⁵Cells

联系方式:021-66980655

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产品详情

大鼠胚胎肢芽间充质干细胞
基本信息
产品名称 : 大鼠胚胎肢芽间充质干细胞
产品品牌 : 纪宁生物
组织来源 : 胚胎
产品规格 : 5×105cells/T25细胞培养瓶


细胞简介  

大鼠胚胎肢芽间充质干细胞分离自胚胎肢芽;胚胎肢芽存在于两栖类以上的大多数脊椎动物胚胎中,在四肢发生的初期阶段,在身体两侧有呈芽状的突起,内部是中胚层侧板的体壁板垱厚形成,表面有表皮覆盖。在这个中胚层区肢芽迅速伸长,不久,在其前端即见有指的突起。在此时期间,其内部的中胚层分化成软骨、肌肉等。

这些分化组织,在将肢芽作分离培养的时候也可以获得。根据对两栖类的有尾类的研究,作为肢原基各部的胚发能力,肢芽物质的大部分是位于背半部,而前半部主要参与基部形成,后半部参与前端的形成。在实验上,即使将肢的原基分成二半,每一半调整好都可形成基本上近于正常形态的肢体,而且肢体各轴的极性和侧性也逐渐决定。

间充质干细胞(M SC )是属于中胚层的一类多能干细胞,主要存在于结缔组织和器官间质中,是具有高度自我更新和多向分化潜能的干细胞;这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量,并在特定条件下转变成为一种或多种构成人体组织或器官的细胞,从而在组织修复等方面发挥积极作用。


方法简介

纪宁生物实验室分离的大鼠胚胎肢芽间充质干细胞采用胰蛋白酶-胶原纪宁合消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶 。


质量检测

纪宁生物实验室分离的大鼠胚胎肢芽间充质干细胞经C D 90免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。


培养信息

培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 : 每2-3天换液一次
生长特性 : 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 : 可传3-5代左右
传代比例 : 1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培养条件 : 气相:空气,95% ;C O2,5%
大鼠胚胎肢芽间充质干细胞体外培养周期有限;建议使用纪宁生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。


细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片


使用方法

大鼠胚胎肢芽间充质干细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在纪宁生物技术部标准操作流程下,细胞可传3-5代左右;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。


客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作

1.取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2.贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1m g/m l),明胶(0.1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。


大鼠胚胎肢芽间充质干细胞

注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和纪宁生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们纪宁系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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