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编号 |
成分 |
规格 |
试剂一 |
5×双酶一管式 RT-PCR Buffer |
200 μL(橘黄盖) |
试剂二 |
MMLV-Taq Mix |
75 μL(红盖) |
试剂三 |
超纯水 |
1 mL(亮黄盖) |
试剂四 |
口蹄疫病毒通用 RT-PCR 引物混合液 |
100 μL(白盖) |
试剂五 |
口蹄疫病毒通用 RT-PCR 阳性对照(1×10E8/μL) |
50 μL(黄盖) |
试剂六 |
使用手册 |
1 份 |
成份
N+2 个
样品管
RT-PCR
阴性对照
RT-PCR
阳性对照
5×双酶一管式RT-PCR Buffer
各 4 μL
4 μL
4 μL
口蹄疫病毒通用 RT-PCR 引物混合液
各 2 μL
2μL
2μL
N+2 个制备的 RNA 样品
各 12.5μL
--
--
超纯水
--
12.5μL
--
口蹄疫病毒通用 RT-PCR 阳性对照的 1000倍稀释液
--
--
12.5μL
MMLV-Taq Mix
1.5 μL
1.5 μL
1.5 μL
4. 上机进行 RT-PCR,RT-PCR 反应参数为:
过程 |
温度 |
时间 |
逆转录 |
42℃ |
30 min |
预变性 |
95℃ |
5 min |
PCR 反应35个循环 |
95℃ |
30 sec |
58℃ |
30 sec |
|
72℃ |
20 sec |
|
最后延伸 |
72℃ |
7 min |