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产品简介:
天冬酰胺酶(ASNase,EC 3.5.1.1)是酰胺酶的一种,催化天冬酰胺水解成天冬氨酸和氨,在氮素代谢中具有重要调控作用。
土壤中的天冬酰胺酶(S-ASNase)催化天冬酰胺水解成天冬氨酸和氨,利用氨在强碱的环境下与次氯酸盐和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚蓝,溶液颜色稳定。其在 630nm处有特征吸收峰,通过检测氨增加的速率,即可计算该酶活性大小。
试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体40mL×1瓶
4℃保存
试剂二
粉剂mg×2 瓶
4℃保存
临用前甩几下使粉体落入底部,每瓶再加 6mL 蒸馏水溶解备用。
试剂三
液体60mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
液体24mL×1 瓶
4℃保存
试剂五
液体12mL×1 瓶
4℃保存
试剂六
A:液体7mL×4瓶
4℃保存
临用前取60μL的B液进一瓶A液中,混匀后作为试剂六使用。混匀后的试剂六一周内用完。
B:液体μL×1支
标准品
液体mL×1 支
4℃保存
若重新做标曲,则用到该试剂。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、台式离心机、可调式移液枪、水浴锅或恒温培养箱、甲苯和蒸馏水。
土壤天冬酰胺酶(S-ASNase)活性测定:
1、样本制备:
取新鲜土样风干或者 37℃烘箱风干,先粗研磨,过 40 目筛网备用。
[注]:土壤风干,减少土壤中水分对于实验的干扰;土壤过筛,保证取样的均匀细腻。