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产品简介:
γ-谷氨酸激酶(γ-GK,EC 2.7.2.11)是脯氨酸生物合成途径中的关键酶之一。催化由谷氨酸生成脯氨酸途径的第一步反应。本试剂盒利用γ-GK 催化谷氨酸磷酸化,进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与 Fe3⁺形成 Hydroxamate-Fe3⁺复合物 ,通过检测该复合物在 535 nm 波长处的 OD 值,进而得出γ-GK 酶活力大小。该酶催化的反应方程式:ATP+L-glutamate=ADP+L-glutamate 5-phosphate。
试剂盒组成和配制:
试剂名称 |
规格 |
保存要求 |
备注 |
提取液 |
液体30mL×1 瓶 |
4℃保存 |
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试剂一 |
液体8mL×1 瓶 |
4℃保存 |
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试剂二 |
粉体mg×1瓶 |
4℃保存 |
临用前甩几下,使粉体落到底部,再加入 10mL 蒸馏水溶解备用 |
试剂三 |
液体 8mL×1瓶 |
4℃保存 |
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试剂四 |
粉体 mg×1 支 |
4℃保存 |
临用前甩几下,使粉体落到底部,再加入 1.8mL 蒸馏水溶解备用。 |
试剂五 |
液体 15mL×1瓶 |
4℃保存 |
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所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、水浴锅、离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
γ-谷氨酸激酶(γ-GK)活性测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样本情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!