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产品简介:
多种微生物、动物、植物等都可产生几丁质酶,高等植物本身不存在作为真菌细胞壁组分之一的几丁质,但当植物受到病原菌感染时,几丁质酶活性迅速提高。因此该酶与植物对病原微生物的抗性有关,是重要的病程相关蛋白。
几丁质酶主要水解几丁质多聚体中β-1,4-糖苷键。依据水解位置的不同可分为几丁质内切酶和几丁质外切酶,几丁质外切酶作用于几丁质后,生成 N-乙酰氨基葡萄糖单体,进一步与铁氰化钾反应,于 420nm 处检测,进而计算得到几丁质外切酶活性大小。
试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体30mL×1瓶
4℃保存
试剂一
液体7mL×1瓶
4℃保存
试剂二
粉体mg×1瓶
4℃保存
临用前甩几下使粉体落入底部,再加 2.5mL 盐酸充分混匀溶解后,再加 2.8mL 蒸馏水混匀备用。
试剂三
液体14mL×1瓶
4℃保存
试剂四
粉体g×1瓶
4℃保存
临用前甩几下使粉体落入底部,再加 30mL 蒸馏水溶解备用。
标准品
粉剂×1支
4℃保存
若重新做标曲,则用到该试剂。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、天平、水浴锅、低温离心机、盐酸。
几丁质外切酶活性测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!