延胡索酸酶(富马酸酶)活性测定试剂盒分光法/48样

品牌：纪宁生物

货号：JN869B

规格： 48样

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产品详情

延胡索酸酶(富马酸酶)活性测定试剂盒分光法/48样

产品简介:
延胡索酸酶又名延胡索酸水化酶（EC 4.2.1.2），存在于线粒体中的富马酸酶是柠檬酸循环中的关键酶之一，存在于胞质中的富马酸酶与氨基酸和富马酸酯的代谢关系密切。
在人类中，该酶缺失会导致严重的健康问题，例如胎儿脑畸形，肌张力低下等。延胡索酸酶催化延胡索酸转化成 L-苹果酸，L-苹果酸在苹果酸脱氢酶的作用下，同时使 NAD+还原成 NADH，通过检测 NADH 在 340nm 的增加速率得出延胡索酸酶的活性大小。

试剂盒组成和配制:

所需的仪器和用品:
紫外分光光度计、1mL 石英比色皿（光径 1cm）、可调式移液器、低温离心机、研钵。

延胡索酸酶活性测定:
1、线粒体制备：（提示：整个线粒体的提取过程须保持 4℃低温环境）：
① 称取约 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂一，用冰浴匀浆器或研钵匀浆，转移至离心管后于 4℃×700g 离心 10min。
② 弃沉淀，上清液移至另一离心管中，4℃×12000g 离心 10min。上清液即胞浆提取物，可用于测定胞浆中的延胡索酸酶（此步可选做），沉淀为线粒体。
③ 在沉淀（线粒体）中加入200μL试剂二和2μL试剂三，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10秒，重复30次），液体置于冰上用于线粒体中延胡索酸酶活性测定。
[注]：若增加样本量，可按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取，或按照细胞数量(10⁴)：提取(mL)为 500~1000：1 的比例进行提取。