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一、基本信息 |
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细胞名称 |
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细胞编号 |
JN-CC2308 |
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细胞品牌 |
纪宁生物 |
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细胞规格 |
1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
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细胞来源 |
人 |
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组织来源 |
乳房 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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细胞形态 |
上皮细胞样 |
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重要提醒 |
细胞复苏和传代过程中，不可使用含有药物的培养基。需在细胞完全贴壁，形态完全展开，生长稳定后，方可根据实验需要添加阿霉素药物。若加药后细胞生长状态较为缓慢，可适当降低阿霉素药物浓度，或使用不含阿霉素的完全培养基培养至细胞生长状态较好时，再更换为所需的阿霉素浓度。冻存时请不要在培养基中加药物。 |
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细胞代数 |
10代以内 |
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细胞货期 |
现货，1周左右 |
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培 养 基 |
89% DMEM +10% FBS+1%PS（30nM的阿霉素） |
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培养条件 |
气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃ |
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冻存条件 |
无血清冻存液，液氮储存 |
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供应范围 |
仅限于科研实验使用，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 |
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支原体检测 |
无 |
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二、细胞培养操作 |
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T25瓶－细胞操作 |
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收货处理 |
用75%酒精擦拭细胞瓶表面，放37度培养箱内静置培养2-4h，以便稳定细胞状态 |
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传代密度 |
细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养 |
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传代比例 |
首次传代建议1:2传代，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。 |
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传代方法 |
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化2-5 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。 |
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1.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。 |
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冻存管－细胞操作 |
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收货处理 |
收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏 |
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传代密度 |
第二天换液并检查细胞密度 |
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传代比例 |
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶 |
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传代方法 |
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）第二天换液并检查细胞密度。 |
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注意事项 |
1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察 2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞。 |
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冻存－细胞操作 |
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冻存液配方 |
无血清冻存液，液氮储存 |
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细胞密度 |
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存，以T25瓶为例。 |
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三、售后服务 |
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细胞予重发 |
1.细胞运输中遭遇的各种问题，细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等，重发。 2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发。 3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发。 4.常温发货的细胞静置2小时后，干冰冻存发货的细胞复苏2天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发。 5.常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后，出现污染，经核实后，重发。 6.细胞活性问题，请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发。 |
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细胞不重发 |
1.客户操作造成细胞污染，不重发。 2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发。 3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发。 4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片，不重发。 5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发。 6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发。 |
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四、特别说明 |
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上海纪宁生物客户购买本公司的细胞过程中，有任何技术问题或实验问题，都可以拨打我们的免费服务电话15800441226 / 021-54721350，我们随时给予技术中／实验中的免费解答。 |
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