英文名称 ： D-lactate Dehydrogenase(D-LDH)Activity Assay Kit
产品包装 ： 盒装
产品规格 ： 100T/48S
储存条件 ： -20℃
检测方法 ： 微量法
有 效 期 ： 6个月
产品组成：
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试剂名称
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规格
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保存条件
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提取液
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液体60mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂一
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液体7mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂二
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粉剂×1支
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-20℃保存
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试剂三
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液体7mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂四
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液体20mL×1瓶
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2-8℃保存
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标准品
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液体1mL×1支
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2-8℃保存
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产品说明：
乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase ，LDH)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径的 末端酶，催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应， 伴随着NAD+/NADH之间互变。根据其催化底物-乳酸构型的不同， 可分为D-乳酸脱氢酶(D-LDH ，EC 1.1.1.28)与L-乳酸脱氢酶(L-LDH ，EC 1.1.1.27 )。
D-LDH催化NAD+氧化D-乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱 性溶液中显棕红色， 颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、 研钵/匀浆器/细胞超 声破碎仪、冰和蒸馏水。
注意事项：
1.如果测定管吸光值接近空白或 ΔA 测定过低，可适当加大样本量后重新测定；如果测定管吸光值超过1.5或 ΔA测定超过 0.4，建议将样本用提取液适当稀释后进行测定。注意同步修改计算公式。
验实例：
1、取0.109g兔肾加入1mL提取液进行冰浴匀浆，按照测定步骤操作，用 96孔板测得计算 ΔA 测定=A 测定-A 对照=0.425-0.298=0.127,带入标准曲线y=0.5379x+0.0087，计算 x=0.220 ,按样本质量计算酶活得：
D-LDH 活性(U/g质量)=66.67×x÷W×F =134.520U/g质量
2、取0.1018g拟南芥加入1mL提取液进行冰浴匀浆，按照测定步骤操作，用96孔板测计算ΔA测定=A测定-A对照=0.236-0.196=0.04 ,带入标准曲线 y=0.5379x+0.0087，计算 x=0.058 ,按样本质量计算酶活得：
D-LDH 活性(U/g质量)=66.67×x÷W×F =38.109 U/g质量
3、取 500万细胞加入1mL提取液进行冰浴匀浆，按照测定步骤操作, 用96孔板测得计算 ΔA 测定=A 测定-A 对照=0.225-0.174=0.051,带入标准曲线 y=0.5379x+0.0087，计算 x=0.079 ,按细菌/细胞数目计算酶活得：
D-LDH 活性(U/10⁴cell)=0.133×x×F =0.010 U/10⁴ cell
4、取10μL胎牛血清，按照测定步骤操作，用96孔板测得计算ΔA测定=A测定-A对照=0.322-0.201=0.121,带入标准曲线y=0.5379x+0.0087，计算 x=0.209 ,
按液体体积计算酶活得：
D-LDH 活性(U/mL)=66.67×x×F =13.919 U/mL
