英文名称 ： α-Ketoglutaric Acid (α-KG) Ccontent Assay kit
产品包装 ： 盒装
产品规格 ： 100T/96S
储存条件 ： -20℃
检测方法 ： 微量法
有 效 期 ： 6个月
产品组成：
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试剂名称
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规格
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保存条件
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提取液一
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液体110mL×1瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液体17mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂一
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液体13 mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂二
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液体1.2 mL×1支
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2-8℃保存
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试剂三
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粉剂×1瓶
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-20℃保存
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试剂四
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粉剂×1支
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-20℃保存
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标准品
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粉剂×1支
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2-8℃保存
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产品说明：
α-酮戊二酸(α-Ketoglutarate，α-KG）是三羧酸循环中重要的代谢中间产物，是连接细胞内碳-氮代谢的关键节 点。α-酮戊二酸作为一种短链羧酸分子， 是谷氨酰胺、谷氨酸等多种重要的氨基酸的前体， 不仅直接参与供能， 还 参与细胞内多种化学反应，具有多种生理作用。
GDH催化NH4+ 、α-酮戊二酸和NADH，生成谷氨酸和NAD+ ，引起340nm吸光度下降。通过测定NADH的变 化，计算α-酮戊二酸含量。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅/金属浴/恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、微量石英比色 皿/96 孔 UV 板、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、蒸馏水和冰。
注意事项：
1. 采用 96 孔 UV 板测定时， 如果样本A1测定＜A1空白或∆A测定大于0.5，可以用蒸馏水对样本进行稀释或者缩短第二步37℃反应时间；如果∆测定小于0.01，可以加大样本量或者延长第二步37℃反应时间。计算时同步修改 计算公式。
2. 采用微量石英比色皿测定时， 如果样本A1测定＜A1空白或∆A测定大于0.8，可以用蒸馏水对样本进行稀释或者缩 短第二步37℃反应时间；如果∆A测定过小，可以加大样本量或者延长第二步37℃反应时间。计算时同步修改计算公式。
3. 提取液一中含有蛋白质沉淀剂， 因此上清液不能用于蛋白浓度测定。如需测定蛋白含量，需另取组织。
4. 温度对该实验影响较大,务必保持反应温度在37℃。
实验实例：
1 、称取0.1066g小鼠肝脏组织,加入提取液进行冰浴匀浆，按照测定步骤操作，用 96 孔UV板测得计算ΔA测定=A1测定-A2测定=0.694-0.679=0.017 ,ΔA标准=A1标准-A2标准=0.594-0.307=0.287,ΔA空白=A1空白-A2空白=0.637- 0.633=0.004 。带入公式计算：
α-KG含量(nmol/g 质量)=475×∆A÷∆A标准÷W×F =204.69 nmol/g质量
