英文名称 :Pyruvate(PA) Content Assay Kit
产品包装 :盒装
产品规格 :50T/48S
储存条件 :2-8℃
检测方法 :可见分光光度法
有 效 期 :6个月
产品组成:
试剂名称
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规格
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保存条件
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提取液
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液体60 mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂一
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液体7 mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂二
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液体30 mL×1瓶
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2-8℃保存
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标准品
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液体1 mL×1支
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2-8℃保存
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产品说明:
丙酮酸通过乙酰 CoA 连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。丙酮酸与 2,4-二硝基苯肼作用, 生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液中呈樱红色。

技术指标:
最低检出限:0.001μmol/mL
线性范围:0.0015-0.25μmol/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
注意事项:
1. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
2. 提取液中含有蛋白变性成分, 若使用蛋白浓度计算需要另取样本提取测定。
实验实例:
1. 称取约0.1171g兔肝,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆,静置30min ,8000g,常温离心10min,取上清待测。 之后按照测定步骤操作,用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定管-A空白管=0.570-0.101=0.469 ,ΔA标准 =A标准管-A空白管=0.541-0.101 =0.440,计算丙酮酸含量得:
PA(μmol/g 质量)=0.125×ΔA测定÷ΔA标准÷W =1.138μmol/g 质量
2. 称取约0.1094g合欢,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆,静置30min ,8000g,常温离心10min,取上清用蒸馏水稀释2倍后待测。之后按照测定步骤操作,用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定管-A空白管=0.886- 0.101=0.785 ,ΔA标准=A标准管-A空白管=0.541-0.101 =0.440,计算丙酮酸含量得:
PA(μmol/g质量)=0.125×ΔA测定÷ΔA标准÷W×稀释倍数=4.077μmol/g质量
3. 取50μL兔血清之后按照测定步骤操作,用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA=A测定管-A空白管=0.146-0.101=0.045, ΔA标准=A标准管-A空白管=0.541-0.101 =0.440,计算丙酮酸含量得:
PA(μmol/mL)=0.1375×ΔA测定÷ΔA标准=0.014μmol/mL