英文名称 ： Butyrylcholinesterase Activity Assay
产品包装 ： 盒装
产品规格 ： 50T/48S
储存条件 ： -20℃
检测方法 ： 可见分光光度法
有 效 期 ： 6个月
产品组成 ：
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试剂名称
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规格
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保存条件
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试剂一
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液体100 mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂二
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粉剂×1瓶
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-20℃保存
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试剂三
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液体30mL×1瓶
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-20℃保存
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产品说明：
丁酰胆碱酯酶(Butyrylcholinesterase，BchE，EC3.1.1.8)，又称血浆胆碱酯酶，假性胆碱酯酶，是一种丝氨酸水解酶，由肝脏合成后进入血液，几乎存在于所有动物组织中。BchE结构与乙酰胆碱酯酶(AchE)相似，但底物特异性和抑制剂敏感性不同。与AchE相比，BchE能够有效水解较大的胆碱酯，如丁酰胆碱和苯甲酰胆碱，而且可以清除有机磷类农药、氨基甲酸酯类农药等神经毒剂的毒害作用。
有研究表明，BchE可作为阿尔茨海默病治疗的重要靶点。BchE催化丁酰胆碱水解生成胆碱，胆碱与二硫对硝基苯甲酸(DTNB)作用生成5-巯基-硝基苯甲酸(TNB)；TNB在412nm处有吸收峰，通过测定412nm吸光度增加速率，计算BchE活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、低温离心机、分析天平、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
注意事项：
为保证结果准确，请严格控制反应时间，建议两人进行实验，一人加样，一人计时。如果∆A测定接近∆A空白，可以增加样本量后再进行测定；如果A2测定大于1或ΔA测定大于0.7，建议将样本上清用试剂一适当稀释后再进行测定。注意同步修改计算公式。
实验实例：
1.取0.1018g大鼠肝脏样本，加入1mL试剂一进行冰浴匀浆，离心后上清液用试剂一稀释4倍，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算：ΔA测定=A测定2-A测定1=0.6807-0.3913=0.2894，ΔA空白=A空白2-A空白1=0.3552-0.2931=0.0621，ΔA=ΔA测定-ΔA空白=0.2273，按样本质量计算得：BchE活性(U/g质量)=[ΔA÷(ε×d)×V反总×10⁹]÷(W×V样÷V样总)÷T×F=2757.966U/g质量。
2.取马血清样本，用试剂一稀释64倍，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算：ΔA测定=A测定2-A测定1=0.5100-0.3436=0.1664，ΔA空白=A空白2-A空白1=0.3552-0.2931=0.0621，ΔA=ΔA测定-ΔA空白=0.1043，按液体体积计算得：BchE活性(U/mL)=[ΔA÷(ε×d)×V反总×10⁹]÷V样÷T×F=2061.302U/mL。
