英文名称 ： Creatine Content Assay Kit
产品包装 ： 盒装
产品规格 ： 50T/24S
储存条件 ： -20℃
检测方法 ： 可见分光光度法
有 效 期 ： 6个月
产品内容：
|
试剂名称
|
规格
|
保存条件
|
|
提取液一
|
液体30mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
提取液二
|
液体5mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
试剂一
|
粉剂×2支
|
-20℃保存
|
|
试剂二
|
粉剂×2支
|
-20℃保存
|
|
试剂三
|
粉剂×2支
|
-20℃保存
|
|
试剂四A液
|
液体15 mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
试剂四B液
|
液体15mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
标准品
|
粉剂×1 支
|
2-8℃保存
|
产品说明：
肌酸(Creatine)是一种含氮化合物，自然存在于脊椎动物体内，能够辅助为肌肉和神经细胞提供能量。肌酸可由精氨酸(arginine)、甘氨酸(glycine)及甲硫氨酸(methionine)三种氨基酸合成，可由人体自行合成，也可以从食物中摄取。大约95%的肌酸存在于骨骼肌中，主要存在形式为磷酸肌酸。
肌酸作为一种补充剂主要通过增加肌肉质量，增强运动表现能力。肌酸也被作为神经肌肉疾病的一种治疗药被广泛研究，它可能有助于保护神经和改善细胞生物功能状态。肌酸酶偶联肌氨酸氧化酶，可将肌酸转化为甘氨酸、甲醛、过氧化氢，过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在505nm有特征吸收峰。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、低温离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水、超声破碎仪。
注意事项：
1、显色完成后，请在10min之内完成检测。
2、提取液中含有蛋白沉淀剂，提取的上清液不能用于蛋白浓度的测定。若想要用蛋白浓度计算肌酐含量需要另取组织或血清(浆)，即取相同质量(体积)的组织(血清(浆))用1.1875mLPBS(生理盐水)匀浆(相当于提取步骤最终样本上清液)，用BCA法进行蛋白浓度测定。
3、如果测定吸光值超过标准管吸光值，建议用蒸馏水稀释样本后再进行测定。如果测定吸光值过小，建议增大样本量后再进行测定。
实验实例：
1、取0.1g大鼠肌肉加入1mL提取液一进行匀浆研磨离心，取0.8mL上清后加0.15mL提取液二，离心取上清后按照测定步骤操作，测得计算ΔA测定=A测定-A对照=0.752-0.012=0.74，ΔA标准=A标准-A空白=0.672-0.014=0.66。按样本质量计算含量得：肌酸含量(μg/g质量)=208.76×ΔA÷ΔA标÷W=2340μg/g质量。
2、取100μL牛血清加入1mL提取液一，取0.8mL上清后加0.15mL提取液二，离心取上清，之后按照测定步骤操作，测得计算ΔA测定=A测定-A对照=0.061-0.016=0.045，ΔA标准=A标准-A空白=0.672-0.014=0.66。按照液体体积计算含量得：肌酸含量(μg/mL)=2296.39×ΔA测定÷ΔA标准=156.57μg/mL血清。
