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2353-45-9/考马斯亮蓝的用途

考马斯亮蓝略带红色,呈粉末状,装在一些塑料小瓶子里;称量取样,加入酒精、磷酸和蒸馏水,按精确的比例配制成溶液,就变为绿色,像半烧杯靛青墨水;但是,一旦遇见蛋白质,它即刻发生奇妙的颜色反应,化作一抹鲜艳的亮蓝。它的名字,其实是它工作时的颜色。

它的分子有好几个疏水的环,以分子间作用力与蛋白质结合,紧密,稳定,蛋白浓度越高,颜色越深,如用一类仪器将颜色深浅转化为数值(关于这类仪器的原理我们先不细讲,等以后有机会再说。),就能测定各种溶液里总蛋白的浓度,鸡蛋清、牛奶、豆芽汤、血浆、细胞质都行,只要有蛋白质就能显色。我学生物的第一课——蛋白质的性质,就提到了这种试剂。

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由于能染色蛋白质,它还有很多别的用途。

其一是观察细胞骨架,那是真核细胞里一种坚韧的丝状蛋白质,纵横交错如三维立体的道路网络,一般在光学显微镜下不可见。取单层洋葱鳞片叶内表皮细胞,用一些有机溶剂浸泡,膜裂解,基质流空,只剩细胞壁和细胞骨架屹立不倒。考马斯亮蓝染色后就可观察到细胞骨架,不够清晰,看不见精细结构,但可供欣赏,像一团团丝丝缕缕的蓝色云雾。

其二是分子生物学实验,当我们得到一块电泳过蛋白质的无色凝胶片,用一锅考马斯亮蓝煮一煮,蛋白质条带就变蓝显形,与冲洗照片相似。第一次和技工老师煮胶片时,我们学生好奇凑近,技工老师警告:离远点,有挥发性,会把人的呼吸道也染成亮蓝。遂惊恐远离,急忙戴口罩。

考马斯亮蓝的用途

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据说,考马斯亮蓝能检测到的蛋白质最低浓度是2.5毫克每升,我曾幻想刑事侦查中用它找血迹一定管用,因为这个浓度相当于一箱水里有一滴血。

又一次做层析(一种过滤分层分离多种混合蛋白质的技术,也是以后细说。),我用小试管接滤液,那小试管里有少量考马斯亮蓝,通过颜色判断何时蛋白质已全部滤出可以停止加水。不料接满了三十多个小试管,一直亮蓝不褪色,甚至不变浅,以为是蛋白太多尚未全部出来,继续加水冲洗层析介质,直到洗涤液已看不出蛋白浑浊色,而小试管仍旧亮蓝不变。再加水,亮蓝亦不变,顿觉异常,突发奇想,将所用考马斯亮蓝滴入所用蒸馏水中。

于是我惊奇地发现,它变蓝了,一碗纯净蒸馏水让考马斯亮蓝显色了。至于水中的蛋白污染是从哪不知不觉进去的,一点粉尘,一些呼出气体还是一个细菌,就不得而知了。但我想幸好没有用它找血迹探案,假如那样就完了,全世界将洒满鲜血了。

来源:考马斯亮蓝