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636-09-9/对苯二甲酸二乙酯的降解方法

背景及概述[1]

对苯二甲酸二乙酯(DTP)是一种含苯环类物质,含苯环类物质在化学工业中具有广泛的应用,因此形成的工业废弃物数量 较多,且苯环类物质对环境有一定毒害作用,对生物甚至有致癌致畸作用,因 此,苯环类物质的降解是研究的热门课题。

对苯二甲酸二乙酯的降解方法

降解方法[1]

采用单一睾丸酮丛毛单胞菌针对对苯二甲酸二乙酯进行降 解,主要包括以下步骤:

(1).菌种的培养:将睾丸酮丛毛单胞菌菌种在30‑37℃、斜面固体培养基 中培养12‑18h,存于4℃冰箱中备用;所述固体培养基的成分是:磷酸二氢钾 3g/L,磷酸氢二钠7g/L,氯化铵1g/L,氯化钠5g/L,硫酸镁0.25g/L,琼脂粉 18g/L和底物3g/L;所述底物为对苯二甲酸二乙酯;

(2).底物溶液的配制:按照液体培养基的成分,配制浓度为1‑5g/L的底 物溶液5‑9份,每份50ml,分别装在150ml锥形瓶中,121℃下包扎灭菌25min 后,冷却后备用;所述液体培养基的成分是:磷酸二氢钾3g/L,磷酸氢二钠7g/L, 氯化铵1g/L,氯化钠5g/L,硫酸镁0.25g/L和底物用量为1‑5g/L;

(3).底物的降解:将(1)中的睾丸酮丛毛单胞菌菌种转接到(2)中的底 物溶液中,制得降解液,并于30‑37℃、振荡培养器转速为200r/min的条件下, 振荡培养、催化降解底物对苯二甲酸二乙酯;

(4).底物降解率的检测:从未反应的零时开始计时,每隔12h,取出一瓶 降解液,95℃水浴灭活5min,冷却后加入10ml正己烷,充分振荡,萃取未溶解 的底物,静置脱泡后,取正己烷层中的液体用正己烷稀释50‑250倍,采用紫外 分光光度计进行400‑190nm波长的扫描,根据240nm处吸收峰的高低,判断底 物含量变化;

(5).底物降解产物的检测:从未反应的零时开始计时,每隔12h,取出一 瓶降解液,95℃水浴灭活5min,冷却后加入10ml正己烷,充分振荡,萃取未溶 解的底物,静置脱泡后,取水层中的液体用蒸馏水稀释50‑250倍,采用紫外分 光光度计进行400‑190nm波长的扫描,根据240nm处吸收峰的高低,判断降解 中间产物对苯二甲酸含量的变化;

当(4)中的正己烷层与(5)中的水层均无吸收峰时,认为底物降解完全, 且中间产物对苯二甲酸降解完全,底物降解彻底。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201010267597.8 一种对苯二甲酸二乙酯的降解方法