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天冬酰胺酶(ASNase/asparaginase)活性测定试剂盒分光法/48样
产品简介:
天冬酰胺酶(EC 3.5.1.1,ASNase)是一种酰胺水解酶,能够将 L-天冬酰胺脱去氨基生成 L-天冬氨酸和氨。该酶具有抗肿瘤活性,在食品和医药等领域应用十分广泛。天冬酰胺酶(ASNase)催化天冬酰胺水解成天冬氨酸和氨,利用氨在强碱的环境下与次氯酸盐和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚蓝,溶液颜色稳定。其在 630nm 处有特征吸收峰,通过检测氨增加的速率,即可计算该酶活性大小。
试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体60mL×1瓶
4℃保存
试剂一
液体20mL×1瓶
4℃保存
试剂二
粉剂mg×2瓶
4℃保存
临用前甩几下使粉体落入底部,每瓶再加
11mL蒸馏水溶解备用。
试剂三
液体20mL×1瓶
4℃保存
试剂四
液体24mL×1瓶
4℃保存
试剂五
液体12mL×1瓶
4℃保存
试剂六
A:液体7mL×4瓶
4℃保存
临用前取60μL的B液进一瓶A液中,混匀后作为试剂六使用。混匀后的试剂六一
周内用完。
B:液体μL×1支
标准品
液体mL×1支
4℃保存
若重新做标曲,则用到该试剂。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、常温离心机、移液器、蒸馏水、振荡仪。
天冬酰胺酶(ASNase)活性测定:
1、样本制备:
① 组织样本:称取约 0.1g 组织(水分足的样本可取 0.2-0.5g),加入 1mL 提取液;进行冰浴匀浆。12000rpm,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。