英文名称 ：Caspase-2 Activity Assay Kit
储存条件 ：-20℃
产品包装 ：盒装
检测方法 ：比色法
有 效 期 ：6个月
产品规格 ：20T 、50T 、100T
产品组成：
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试剂名称/规格
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20T
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50T
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100T
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保存条件
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试剂一
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液体20mL×1瓶
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液体20 mL×1瓶
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液体25 mL×1瓶
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-20℃保存
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试剂二
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液体30 mL×1瓶
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液体60 mL×1瓶
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液体120mL×1瓶
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-20℃保存
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试剂三
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液体0.25L×1支
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液体0.55mL×1 支
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液体0.55mL×2支
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-20℃保存
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标准品
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液体1mL×1支
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液体1 mL×1支
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液体1 mL×1 支
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-20℃保存
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产品说明：
Caspase 是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。Caspase-2 也称 Ich- 1 或 Nedd-2，在细胞凋亡的信号转导过程中被激活。Caspase-2的mRNA 具有两种不同剪切变体，其全长mRNA翻译的蛋白可促进凋亡， 而短蛋白产物则可抑制凋亡。
试剂盒测定原理基caspase-2特异水解其多肽底物N-acetyl-Val-Asp-Val-Ala-Asp-pNA (Ac-VDVAD-pNA)， 释放出游离的硝基/苯胺 pNA，后者呈黄色在405nm具有大吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于 Caspase-2 的水解活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、 100μL 玻璃比色皿/96 孔板、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、研 钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
注意事项：
1、由于试剂二中含有还原剂（DTT），建议将样本用水稀释 2 倍后， 用 Bradford 法测定蛋白浓度，以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。不建议使用 BCA 法测定蛋白浓度。
2 、Caspase 活性测定值低常见的原因是细胞未发生凋亡或细胞量太少，其次是观测时间不恰当。诱导凋亡时， 并非剂量越大时间越长 Caspase 活性就越高。建议设置不同剂量和时间点如 0、2 、4 、8、16、24 小时，以检 测佳的观察点。
3、所测样本的值高于标准曲线上限时，可用试剂二稀释样本后重新测定。
4、盖紧96 孔板盖子并用封口膜密封。37ºC孵育， 肉眼可见颜色变黄时的 OD405 值约为0.2，此时即可测定。颜色变化不明显可延长反应或过夜，但酶活性较强时，孵育时间过长将导致反应失去线性关系。
