D-乳酸(D-LA)/含量检测试剂盒(WST显色法)/50T

品牌：纪宁生物

货号：JN37872

规格： 50T/24S

联系方式：021-54721350

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产品详情

中文名称： D-乳酸(D-LA)/含量检测试剂盒(WST显色法)/50T

英文名称： D-Lactic acid(D-LA)Content Assay Kit

产品包装：盒装

产品规格： 50T/24S

储存条件： -20℃

检测方法：可见分光光度法

有效期： 6个月

产品组成：

试剂名称	规格	保存条件
提取液一	液体30 mL×1瓶	2-8℃保存
提取液二	液体5 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一	液体30 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂二	粉剂×2支	-20℃保存
试剂三	粉剂×1瓶	-20℃保存
试剂四	液体12 mL×1瓶	2-8℃保存
标准品	液体 1mL×1支	-20℃保存

产品说明：

乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物，与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关，乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。D-乳酸在D-乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸，同时使NAD+还原生成NADH和H+,在1-mPMS作用下，WST- 1可与NADH反应，产生水溶性formazan,其在450nm处有吸收峰，据此可计算D-乳酸含量。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、分析天平、研钵/匀浆器/超声波细胞破碎仪、离心机、1m玻璃比色皿、水浴锅/恒温培养箱、蒸馏水和冰。

注意事项：

1. 提取液一中含有蛋白质沉淀剂，因此上清液不能用于蛋白浓度测定。如需测定蛋白含量，需另取组织。

2. ΔA测定的测定范围在0.01- 1.2之间。如果测定吸光值超过线性范围吸光值可以用蒸馏水稀释样本后再次测定，如果测定吸光值小于线性范围吸光值，需要增加样本量后再次测定，注意同步计算公式。

实验实例：

1 , 取0.104g兔肌肉加入1mL提取液一，冰浴匀浆后离心，取0.8mL上清后加0.15mL提取液二，离心取上清后按照测定步骤操作，使用比色皿测得计算ΔA测定=A测定管-A 对照管=0.637-0.308=0.329 ,ΔA 标准=A标准管-A空白管=0.636-0.124=0.512，

按照样本质量计算含量得：

D-LA含量(μmol/g质量)= 0.3711×ΔA 测定÷ΔA标准÷W =2.2929μmol/g质量。取100μL牛血清加入1mL提取液一，离心，取0.8m上清后加0.15mL提取液二，离心取上清，之后按照测定步骤操作，使用比色皿测得计算 ΔA测定管=A测定管-A对照管=0.356-0.302=0.054 ,ΔA 标准=A标准管-A空白管=0.636-0.124=0.512，按照液

体体积计算含量得：

D-LA含量(μmol/mL)=4.082×ΔA测定÷ΔA标准=0.4305μmol/mL。

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