英文名称 ： Protein Disulfide Bond Content Assay Kit
产品包装 ： 盒装
产品规格 ： 100T/48S
储存条件 ： 2-8℃
检测方法 ： 微量法
有 效 期 ： 6个月
产品组成：
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试剂名称
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规格
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保存条件
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提取液一
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液体 40mL×1瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液体40mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂一
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液体120mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂二
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液体20mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂三
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液体6mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂四
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液体1.2mL×1瓶
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2-8℃保存
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粉剂一
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粉剂×1瓶
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2-8℃保存
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标准品
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粉剂×1 支
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2-8℃保存
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产品说明：
蛋白质是一类重要的生物大分子，存在于一切生物体内，是生命的基础物质。二硫键是连接不同肽链或同一 肽链中，两个不同半胱氨酸残基的巯基的化学键。二硫键对蛋白质的结构影响很大，在蛋白质分子中，起着稳定 肽链空间结构的作用，所以测定蛋白质二硫键含量尤为重要。
还原剂会使二硫键裂解,裂解后的巯基会发生亲核反应， 即巯基与5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物，在412nm处有吸收峰，据此可以计算蛋白质二硫键含量。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、低温离心机、研钵/匀浆器、丙酮(AR)、蒸馏水。
注意事项：
1.若样本ΔA测定<0.01 ，可适当增大样本量后测定，注意同步修改空白管和标准管及计算公式；若样本ΔA测 定>1.5,可用试剂一稀释沉淀溶解液后测定，注意同步修改计算公式中的稀释倍数。
实验实例：
1、取 100μL 马血清，按照测定步骤操作，用 96 孔板测得 ΔA 测定=(A2测定-A1测定)-(A2 对照-A1 对照)=(0.348-0.113)-(0.047-0.045)=0.233 ，ΔA标准=A标准-A空白=0.417-0.105=0.312，按样本液体体积计算蛋 白质二硫键含量得：
蛋白质二硫键含量(μmol/mL)= 1.25×ΔA 测定÷ΔA 标准×F =0.933μmol/mL。
2、取0.1036g鼠肝，按照测定步骤操作，用96孔板测得ΔA测定=(A2 测定-A1 测定)-(A2 对照-A1 对照)=(0.475-0.107)-(0.261-0.105)=0.212,ΔA 标准=A标准-A空白=0.417-0.105=0.312，按样本质量计算蛋白质 二硫键含量得：
蛋白质二硫键含量(μmol/g质量)=0.125×ΔA测定÷ΔA 标准÷W×F =0.820μmol/g质量。
3、取 0. 1078g 黄豆粉，沉淀溶解液用试剂一稀释 2 倍后， 按照测定步骤操作， 用 96 孔板测得ΔA测定=(A2 测 定-A1测定)-(A2对照-A1对照)=(0.762-0.084)-(0.123-0.070)=0.625 ，ΔA标准=A标准-A空白 =0.417-0.105=0.312，按样本质量计算蛋白质二硫键含量得：
蛋白质二硫键含量(μmol/g质量)=0.125×ΔA测定÷ΔA 标准÷W×F =4.646μmol/g质量。
