英文名称 ： Protein Disulfide Bond Content Assay Kit
产品包装 ： 盒装
产品规格 ： 50T/24S
储存条件 ： 2-8℃
检测方法 ： 可见分光光度法
有 效 期 ： 6个月
产品组成：
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试剂名称
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规格
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保存条件
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提取液一
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液体 25 mL×1 瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液体 25mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂一
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液体60mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂二
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液体20mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂三
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液体15mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂四
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液体3mL×1瓶
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2-8℃保存
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粉剂一
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粉剂×1瓶
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2-8℃保存
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标准品
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粉剂×1 支
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2-8℃保存
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产品说明：
蛋白质是一类重要的生物大分子，存在于一切生物体内， 是生命的基础物质。二硫键是连接不同肽链或同一 肽链中，两个不同半胱氨酸残基的巯基的化学键。二硫键对蛋白质的结构影响很大，在蛋白质分子中，起着稳定 肽链空间结构的作用，所以测定蛋白质二硫键含量尤为重要。
还原剂会使二硫键裂解,裂解后的巯基会发生亲核反应， 即巯基与5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸（DTNB）反应,生成黄色化合物，在412nm处有吸收峰，据此可以计算蛋白质二硫键含量。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、低温离心机、 研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、丙酮（AR）、蒸馏水。
注意事项：
若样本ΔA测定<0.01,可适当增大样本量后测定，注意同步修改空白管和标准管及计算公式；若样本ΔA测 定>1.5,可用试剂一稀释沉淀溶解液后测定，注意同步修改计算公式中的稀释倍数。
实验实例：
1、取 100μL马血清，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得ΔA测定=（A2 测定-A1 测定）-(A2 对照-A1对照)=（0.557-0.110)-(0.038-0.021)=0.430 ，ΔA标准=A 标准-A 空白=0.633-0.076=0.557，按样本液体体 积计算蛋白质二硫键含量得：
蛋白质二硫键含量(μmol/mL）=1.25×ΔA测定÷ΔA标准×F =0.965μmol/mL。
2、取0.1036g鼠肝，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得ΔA测定=（A2测定-A1 测定）-（A2对照-A1 对照）=（0.727-0.111）-（0.339-0.095）=0.372 ，ΔA 标准=A 标准-A 空白=0.633-0.076=0.557，按样本质量计 算蛋白质二硫键含量得：
蛋白质二硫键含量(μmol/g 质量）=0.125×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W×F=0.806μmol/g 质量。
3、取 0.1078g 黄豆粉，沉淀溶解液用试剂一稀释 2 倍后， 按照测定步骤操作，用 1mL 玻璃比色皿测得 ΔA 测定=
（A2 测定-A1 测定）-（A2 对照-A1 对照）=（1.080-0.068）-（0.108-0.033）=0.937 ，ΔA标准=A标准-A空白=0.633-0.076=0.557，按样本质量计算蛋白质二硫键含量得：
蛋白质二硫键含量(μmol/g质量)= 0.125×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W×F =3.901μmol/g质量。
