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丁酰胆碱酯酶(BchE)/活性检测试剂盒/100T

品牌:纪宁生物

货号:JN37961

规格: 100T/96S

联系方式:021-66980655

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产品详情

中文名称 : 丁酰胆碱酯酶(BchE)/活性检测试剂盒/100T
英文名称 : Butyrylcholinesterase Activity Assay
产品包装 : 盒装
产品规格 : 100T/96S
储存条件 : -20℃
检测方法 : 微量法
有 效 期  : 6个月

产品组成:

试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体125 mL×1瓶

2-8℃保存

试剂二

粉剂×1瓶

-20℃保存

试剂三

液体12mL×1瓶

2-8℃保存


产品说明:

丁酰胆碱酯酶(Butyrylcholinesterase,BchE,EC3.1.1.8),又称血浆胆碱酯酶,假性胆碱酯酶,是一种丝氨酸水解酶,由肝脏合成后进入血液,几乎存在于所有动物组织中。BchE结构与乙酰胆碱酯酶(AchE)相似,但底物特异性和抑制剂敏感性不同。


与AchE相比,BchE能够有效水解较大的胆碱酯,如丁酰胆碱和苯甲酰胆碱,而且可以清除有机磷类农药、氨基甲酸酯类农药等神经毒剂的毒害作用。有研究表明,BchE可作为阿尔茨海默病治疗的重要靶点。BchE催化丁酰胆碱水解生成胆碱,胆碱与二硫对硝基苯甲酸(DTNB)作用生成5-巯基-硝基苯甲酸(TNB);TNB在412nm处有吸收峰,通过测定412nm吸光度增加速率,计算BchE活性。




注意:
实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品 :
可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、分析天平、水浴锅/恒温培养箱、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。

注意事项:
1.为保证结果准确,请严格控制反应时间,建议两人进行实验,一人加样,一人计时
2.如果∆A测定接近∆A空白,可以增加样本量后再进行测定;如果A2测定大于1或ΔA测定大于0.7,建议将样本上清用试剂一适当稀释后再进行测定。注意同步修改计算公式。

实验实例:
1.取0.1018g大鼠肝脏样本,加入1mL试剂一进行冰浴匀浆,离心后上清液用试剂一稀释2倍,按照测定步骤操作,用96孔板测得计算:ΔA测定=A测定2-A测定1=0.636-0.417=0.219,ΔA空白=A空白2-A空白1=0.188-0.180=0.008,ΔA=ΔA测定-ΔA空白=0.211,按样本质量计算得(光径为0.6cm带入计算):BchE活性(U/g质量)=[ΔA÷(ε×d)×V反总×10⁹]÷(W×V样÷V样总)÷T×F=2133.49U/g质量。

2.取人血清样本,用试剂一稀释16倍,按照测定步骤操作,用96孔板测得计算:ΔA测定=A测定2-A测定1=0.960-0.299=0.661,ΔA空白=A空白2-A空白1=0.188-0.180=0.008,ΔA=ΔA测定-ΔA空白=0.653,按液体体积计算得(光径为0.6cm带入计算):BchE活性(U/mL)=[ΔA÷(ε×d)×V反总×10⁹]÷V样÷T×F=5377.237U/mL。
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