谷胱甘肽还原酶活性系数(GRAC)/检测试剂盒/50T

品牌：纪宁生物

货号：JN38084

规格： 50T/24S

联系方式：021-66980655

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产品详情

中文名称： 谷胱甘肽还原酶活性系数(GRAC)/检测试剂盒/50T

英文名称： Glutathione Reductase Activation Coefficient Assay Kit

产品包装：盒装

产品规格： 50T/24S

储存条件： -20℃

检测方法：可见分光光度法

有效期： 6个月

产品组成：

试剂名称	规格	保存条件
试剂一	液体40 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂二	粉剂×1支	2-8℃保存
试剂三 A	粉剂×1支	-20℃保存
试剂三 B	液体1mL×1支	2-8℃保存
试剂四	液体1.2mL×1支	2-8℃保存
试剂五	粉剂×1支	-20℃保存
试剂六	液体20 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂七	液体50 mL×1瓶	2-8℃保存

产品说明：

谷胱甘肽还原酶(GlutathioneReductase，GR)是广泛存在于真核与原核生物中的一种黄素蛋白氧化还原酶，该酶以核黄素衍生物核黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)为辅基，催化NADPH还原氧化型谷胱甘肽(GSSG)生成还原型谷胱甘肽(GSH)，维持巯基和膜蛋白处于还原状态。当生物体内缺乏核黄素时，FAD含量相应减少，GR活性也随之降低，谷胱甘肽还原酶活性系数(GRActivationCoefficient，GRAC)迅速升高，出现唇炎、口角炎、结膜炎等临床症状。

因此，GRAC用于核黄素营养状况评价，对于早期发现缺乏病患者采取防治措施具有重要意义。GR催化NADPH还原GSSG，生成GSH，GSH与5，5’-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸)(5，5’-dithiobis-2-nitrobenoicacid，DTNB)反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸，2-硝基-5-巯基苯甲酸在波长412nm处有特征吸收峰，通过412nm处吸光度的变化可计算GR的活性。根据加入FAD前后GR活性的变化可计算得到GRAC。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、低温离心机、分析天平、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。

注意事项：

1.建议准备核黄素水平正常的样本进行检测，方便与核黄素缺乏的样本进行比较；如果没有核黄素水平正常的样本，可参考一般核黄素水平正常的样本GRAC为0.9-1.2；

2. 如果样本测定管吸光值大于1.5，建议将样本用试剂一稀释后进行测定；如果样本测定管吸光值接近空白管，可适当增大样本质量重新提取或提高加样表中样本体积，对照管、空白管蒸馏水需进行相应调整。

3. 样本蛋白浓度需自行测定。由于提取液中含有一定浓度的蛋白(约0.11mg/mL），所以在测定样本蛋白浓度时需要减去提取液本身的蛋白含量。

实验实例：

1. 取0.1051g大鼠肾脏样本，加入1mL试剂一进行冰浴匀浆，离心后取上清，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得：A测定=0.482，A对照=0.465，A空白=0.084，计算得：GRAC=(A测定-A空白)÷(A对照-A空白)=1.045。

2. 取10μL人红细胞，加入990μL试剂一，充分溶血混匀，离心后取上清，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得：A测定=0.530，A对照=0.529，A空白=0.084，计算得：GRAC=(A测定-A空白)÷(A对照-A空白)=1.002。

3. 取马血清样本，直接按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得：A测定=0.453，A对照=0.451，A空白=0.084，计算得：GRAC=(A测定-A空白)÷(A对照-A空白)=1.005。

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