英文名称 : ATP Content Assay Kit(WST-1 Method) 
	产品包装 : 盒装 
	产品规格 : 50T/48S 
	储存条件 : -20℃ 
	检测方法 : 可见分光光度法 
	有 效 期 :  6个月 
	
产品组成: 
	
		
			| 
					试剂名称 
				 | 
					规格 
				 | 
					保存条件 
				 | 
		
			| 
					提取液 
				 | 
					液体 60 mL×1 瓶 
				 | 
					2-8℃保存 
				 | 
		
			| 
					试剂一 
				 | 
					液体 45 mL×1 瓶 
				 | 
					2-8℃保存 
				 | 
		
			| 
					试剂二 
				 | 
					粉剂×1 瓶 
				 | 
					2-8℃保存 
				 | 
		
			| 
					试剂三 
				 | 
					液体 8 mL×1 瓶 
				 | 
					2-8℃保存 
				 | 
		
			| 
					试剂四 
				 | 
					粉剂×3 支 
				 | 
					-20℃保存 
				 | 
		
			| 
					试剂五 
				 | 
					粉剂×1 瓶 
				 | 
					2-8℃保存 
				 | 
		
			| 
					试剂六 
				 | 
					粉剂×3 支 
				 | 
					-20℃保存 
				 | 
		
			| 
					试剂七 
				 | 
					液体 12 mL×1 瓶 
				 | 
					2-8℃保存 
				 | 
		
			| 
					标准品 
				 | 
					粉剂×1 支 
				 | 
					-20℃保存 
				 | 
	
	
 
	产品说明: 
	ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。 
	HK 催化葡萄糖和 ATP合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化 6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH, WST- 1可与NADPH 反应,产生水溶性formazan,在450nm下有特征吸收峰。 
	
 
	
 
	注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
	
 需自备的仪器和用品: 
	可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、低温离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器/超声波 细胞破碎仪、蒸馏水、冰和氯仿。 
	
注意事项: 
	1 、加入提取液离心后的上清若为浑浊为正常现象。 
	2 、如果 ΔA 测定>1.5,建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。注意计算公式中乘以稀释倍数;如果吸光值过低 或接近空白,建议统一放置于 37℃水浴锅/恒温培养箱中培养2h或更长时间后再次测定, 也可以加大样本量后进行测定,注意同步修改计算公式。 
	3 、提取液中含蛋白变性成分,若按蛋白浓度计算需要另取样本重新计算。 
	
 实验实例: 
	1 、取0.108g小鼠脑加入1mL提取液进行冰浴匀浆,10000g 4℃离心10min,取上清至另一EP 管中,加入500μL的氯仿充分震荡混匀,10000g 4℃离心3min,取上清,置冰上按照测定步骤操作,使用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=0.283-0.154=0.129 ,ΔA标准=A标准-A空白=0.569-0.154=0.415,按样本质量计算含量得:ATP含量(μmol/g质量)=0.3125×ΔA测定÷ΔA 标准÷W=0.899μmol/g 质量。 
	2 、取 0.111g绿萝叶片加入1mL提取液进行冰浴匀浆,10000g 4℃离心10min,取上清至另一EP管中,加入500μL的氯仿充分震荡混匀,10000g 4℃离心3min,取上清,置冰上按照测定步骤操作,使用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=0.387-0.154=0.233 ,ΔA标准=A标准-A 空白=0.569-0.154=0.415,按样本质量计算含量得:ATP含量(μmol/g 质量)=0.3125×ΔA测定÷ΔA 标准÷W=1.58μmol/g质量。