上海纪宁生物与你分享小鼠ELISA试剂盒的使用技巧

别人的，都是故事。自己的，才是生活。听一千遍别人的故事，不如做一件自己的事。只要下定了决心，从什么时候开始都不晚，做行动的巨人。充实自己，强大自己，才是最好的靠山!早啊!上海纪宁生物与你分享小鼠ELISA试剂盒的使用技巧！

1 仔细阅读说明书，熟悉整个流程，推荐画出简要步骤图；提前准备试剂。
2 样本的准备：尽量使用新鲜样本，不使用有溶血，被细菌污染、标本保存时间过长和标本凝固不全的样本。小鼠ELISA试剂盒检测宜采集新鲜标本，如不能立即测定，5天之内应4℃保存，对于1周后检测的样本应低温冻存；做好分装，长时间冻存的样本避免反复冻融。
3 不同批次的小鼠ELISA试剂盒不要混用，检查各组分的有效期。
4 预包被的酶标板条和各试剂组份需要室温平衡30min以上，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需温度，预防后续实验中由于孵育温度或是时间不够充分，而将一些弱阳性样本不能检出。
5 待测样本加样：待检样本过多时，建议分批操作；需要稀释的样本提前做好稀释，注意选对合适稀释液；控制好加样时间，避免加样费时过长造成误差；注意加样角度，垂直加入孔底，不要接触孔壁, 做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。
6 温育和洗板：温育时间和温度一般根据试剂盒的说明书进行选择。温育时可以采用水浴或者湿盒孵育,避免“边缘效应”。①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅。
7 显色：一般是以双组份（A：过氧化脲工作液，B液：TMB 工作液）为底物显色液。反应条件为37℃避光孵育15-30min。
8 读数和数据分析：终止后读取结果尽量在15min内完成，读取OD值时酶标仪需先预热15～30 min再进行。数据分析一般用四参数和直线拟合法，选择哪种拟合方式，可以依据标曲的相关系数（R2）来确定，R2一般大于0.95可用。大于0.99是最佳。
ELISA试剂盒是一个很好的科研工具只要选对了、用对了实验就会事半功倍。以上是上海纪宁生物分享的如何使用小鼠ELISA试剂盒技巧希望对您有所帮助。