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牛血清是细胞培养实验中最常用的培养基补充物之一。它作为一种成分复杂的混合物,可以为细胞提供丰富的营养物质、生长因子和多种促贴壁因子,从而促进细胞的增殖与存活。
胎牛血清是一种高度富含细胞生长因子、激素和蛋白质的补充物,因此在细胞培养中被广泛用于促进细胞生长。然而,它的成分复杂且批次间差异大,并存在携带病原体和引发免疫反应的风险。
新生牛血清其主要特点是抗体(尤其是IgG)含量远高于胎牛血清。虽然它的生长因子含量不如FBS丰富,但仍具有一定的促生长能力。因此,它通常不适用于免疫细胞(如淋巴细胞)的培养,因为高浓度的抗体会严重干扰实验结果。NCS主要被用作一种经济高效的补充物,用于大规模或常规的细胞维持培养,特别是那些生命力顽强、对血清质量不敏感的细胞系
小牛血清是从小牛血液中提取的血清。它和FBS的主要区别在于,其生长因子浓度较低,而免疫球蛋白(抗体)等大分子蛋白质含量更高。这使得它的促增殖效果不如FBS强劲,因此常被用作一种经济型选择,适用于培养对生长因子依赖性较低的细胞系,或用于细胞的维持而非快速扩增,例如在某些肌肉细胞和骨髓细胞的培养中。
成牛血清是从成年牛血液中提取,其“低生长因子、高抗体”的特性最为显著。与胎牛血清相比,它的生长因子水平最低,而免疫球蛋白等总蛋白含量最高。这种成分特点使其不适合大多数细胞的增殖培养。因此,ABS在细胞培养中极为罕见,它最常见的用途是凭借其高蛋白和低成本的优势,在WesternBlot或ELISA等免疫分析实验中用作封闭液,以减少背景信号。
《中华人民共和国药典》(2020版,三部)的定义:
新生牛血清:主要为满足人用生物制品(如疫苗)生产的质控要求。其定义为:“本品系取自出生后24小时内未哺乳的新生牛的血液,经分离、除菌过滤制成的液体。”这一严格规定旨在确保血清中的母源抗体含量极低。
《中国药典》并未对其他类型的牛血清(如胎牛血清)设立独立的通用标准。
《中华人民共和国兽药典》(2020版)的定义:
新生牛血清:定义为:“本品系取自出生后14d内未采食初乳的新生牛的血液,经分离、除菌过滤制成的液体。”这里的时间范围(14天)远长于《中国药典》的规定。
胎牛血清:定义为:“本品系无菌采集健康妊娠母牛屠宰时的胎牛血液,经分离、除菌过滤制成的液体。”该定义较为宽泛,并未限定具体的胎龄或采集方法。行业内普遍认为通过心脏穿刺采集的孕晚期胎牛血清质量更优,但这属于生产工艺的优化,而非药典的强制规定。
选择优质供应商:为保证实验结果的稳定性和可重复性,应选择信誉良好、质控严格的血清供应商,并索要其质检报告,确保产品无菌、无支原体、内毒素含量低。
进行批次测试:鉴于血清存在显著的批次间差异,更换新批次血清前必须进行测试。通过比较不同批次对目标细胞的生长支持能力,筛选出最适合的批次进行实验。
正确储存与使用:血清需在-20°C或以下避光冻存。为避免反复冻融破坏其有效成分,首次解冻后应立即无菌分装成单次用量,后续只取用分装管,避免整瓶多次冻融。
综上所述,牛血清并非简单的“细胞粮食”,而是一种高度可变的关键实验试剂。无论是胎牛血清的高效能,还是成牛血清的经济性,其选择都必须与具体的细胞类型、实验目的和质控标准紧密挂钩。因此,深入理解不同血清的特性、严格遵守使用规范,并坚持进行批次筛选,这并非可有可无的附加步骤,而是确保实验科学性与可重复性的核心要求。