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ELISA是什么检测方法?一文读懂ELISA检测

  ELISA简称酶联免疫吸附实验是一种免疫测定方法,检测者可以利用ELISA试剂盒量化样品中特定目标水平。ELISA在多个领域广泛应用,例如生物学、临床医学、食物和环境科学检测等等。ELISA是什么检测方法?在本文中上海纪宁生物从以下几个方面为您详细介绍。

  目录

  1什么是ELISA

  2Elisa检测方法

  3Elis的应用

  什么是ELISA

  文章开头介绍ELISA是一种免疫测定方法,它是基于板检测技术。ELISA利用特异性抗体(或抗原)捕获样品中的目标抗原(或抗体),并利用酶和底物的反应检测/定量目标分子方法。

  根据抗原抗体组合,该检测称为直接ELISA、间接ELISA、夹心ELISA和竞争ELISA

  ELISA检测方法

  直接ELISA

  在直接ELISA法中,将已知抗原以特异性方式直接吸附在酶标板上,通过添加酶标记抗体,该抗体能特异性结合在目标抗原,然后加入底物,与酶标记抗体结合的酶会催化底物产生颜色或荧光信号,这一信号的强度与抗原的量成正比,从而可以定量分析抗原的浓度。

  间接ELISA

  将已知抗原以特异性方式直接吸附在酶标板上,将含有抗体的样品添加到抗原包被的孔中,以与抗原结合。然后加入酶标二抗特异性结合一抗,在加入特定的底物,酶标记的二抗催化底物产生颜色变化。通过酶标仪测量吸光度,从而定量分析样品中抗原的抗体水平。

  间接ELISA之所以多出一个步骤,是因为它利用了二抗来间接标记样品中的一抗,这不仅提高了检测的灵活性(因为不同的一抗可以共用同一种酶标二抗),而且通常能提高检测的灵敏度,因为它允许更多的抗体参与反应,从而放大信号。

  ELISA夹心法

  ELISA夹心法将抗原夹在抗体之间,将一种针对目标抗原特定表位的抗体固定在微孔板的表面上,将含有抗原的样品加入到孔中并清洗以去除游离抗原。然后加入与抗原上另一个表位结合的酶联二抗。将酶特异性底物添加到平板上,酶催化底物产生颜色变化或荧光,这一信号的强度与最初样本中抗原的量成正比,从而实现抗原的定量检测。

  竞争ELISA

  竞争性ELISA的微孔板会预先包被与目标抗原具有特异性的抗体,样本中的未标记抗原与酶标记的已知浓度的抗原(标记抗原)同时加入到这些孔中。使两者竞争与固相上的抗体或抗原结合位点。加入底物,酶催化底物产生颜色变化。颜色越浅,表明样本中的抗原浓度越高,因为更多的标记抗原被竞争掉。

  上述是实验室常用的ELISA检测方法,每个检测方法都有各自特点,具体使用哪种方法要结合自己的实验目标以及样本检测。接下来,我们了解下ELISA具体应用。

  Elisa应用

  ELISA是一种免疫学检测,在基础科学研究、临床研究和诊断中有着广泛的用途。

  生物医学研究:

  ELISA是一种有效的技术,不仅在一般的生物医学研究中很有价值,而且可作为诊断工具。它可以检测出各种类型的极低水平和数量的生物分子。尽管存在局限性,但ELISA仍然是基础研究中的重要工具,并在过去几十年中改变了生物医学研究。

  ELISA在生物医学研究中的一些应用方式:

  蛋白质定量: ELISA通常用于定量样本中特定蛋白质的含量。这可以帮助研究人员了解细胞和组织中蛋白质的表达和调控。

  抗体检测: ELISA用于检测和量化生物样本(如血清或血浆)中的抗体。这有助于了解免疫系统如何对病原体或疫苗作出反应。

  药物研发: ELISA可用于筛选大量化合物库,以确定其与特定蛋白质的结合能力。这有助于识别潜在的候选药物以供进一步开发。

  生物标志物发现:生物标志物是可用于指示疾病的存在、严重程度或进展的分子。这可以帮助科学家检测和测量某些生物标志物,这些生物标志物有可能帮助诊断、监测和治疗疾病。

  临床诊断:

  ELISA是临床环境中广泛使用的诊断工具。它可以检测血液或其他体液中是否存在特定抗体或抗原,因此可用于诊断多种疾病。该检测可作为诊断急性感染的替代工具,并且适合在资源有限的环境中筛查大量样本。基于ELISA的传染性血清学是准确诊断和预后最可靠的方法之一。目前已开发并上市了多种用于检测传染性病原体的先进检测方法。

  ELISA在临床诊断中的一些应用方式包括:

  传染病诊断: ELISA通常用于诊断由细菌、病毒和其他病原体引起的传染病。例如,ELISA可以检测人体对病原体产生的抗体,表明当前或过去的感染。ELISA用于诊断HIV /AIDS、乙型肝炎和丙型肝炎、莱姆病和梅毒等疾病。

  过敏测试: ELISA可用于检测免疫系统对花粉、尘螨或食物等过敏原产生的特定IgE抗体。ELISA可帮助诊断过敏并确定引起症状的过敏原。

  自身免疫性疾病诊断: ELISA用于检测免疫系统产生的攻击人体自身组织的自身抗体。ELISA可用于诊断狼疮、类风湿性关节炎和多发性硬化症等自身免疫性疾病。

  癌症诊断: ELISA可用于检测肿瘤标志物,即癌细胞产生的物质,可在血液或其他体液中找到。ELISA可帮助诊断某些类型的癌症,例如前列腺癌和卵巢癌。

  药物水平监测: ELISA可用于监测血液中的药物水平,以确保药物处于治疗水平且无毒性。ELISA还可用于通过测量尿液中的药物或其代谢物的水平来检测药物滥用。

  食品安全检测:

  ELISA用于识别食品中存在的过敏原、病原体和其他污染物。这是一种廉价而快速的方法,可用于筛选大量食品样本以进行质量控制和安全目的。ELISA也是牛奶、鱼、转基因食品、辐照食品或其他可能影响人类健康的危险食品成分(如牛海绵状脑病)质量控制的重要技术。

  ELISA用于食品安全检测的许多不同领域,包括食源性病原体的检测、食品加工和生产的监控以及进口食品的筛查。

  上述为大家介绍了ELISA及检测方法,通过上述了解,相信您对ELISA有个认识。纪宁生物为支持大家科研,我们有科研使用ELISA试剂盒,欢迎前来选购!

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