纪宁生物讲解大鼠ELISA双抗体夹心法操作步骤

纪宁生物给大家讲解下大鼠ELISA双抗体夹心法操作步骤有哪些：

（1）包被：用包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1-10 μg/mL。在酶标板反应孔中加0.1 mL，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗板3 次，每次3 min。
（2）加样：加一定浓度稀释的待检样品（同时做空白对照，阴性对照孔及阳性对照）0.1 mL 于上述已包被的反应孔中，置湿盒中，37℃， 1 hr。用洗涤缓冲液洗板3 次，每次3 min。
（3）加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体 （经滴定后的稀释度） 0.1ml。
37℃，0.5 - 1 hr，用洗涤缓冲液洗板3 次，每次3 min。
（4）加底物液显色：于各反应孔中加入现配的TMB 底物溶液0.1 mL，37 ℃，10 - 30min。
（5）终止反应：于各反应孔中加入终止液0.05 mL。
（6）结果判定：将酶标板在酶标仪上，于450 nm （若ABTS 显色，读410 nm），读数，输出到Excel 中。
（7）以标准品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，生成标准曲线和直线回归方程式，根据公式计算未知样品的浓度，并记录。
上海纪宁生物大鼠ELISA双抗体夹心法采用进口材料生产，专业的酶免专家，提供免费代测，数据分析，技术服务。产品远销全国各地。多年以来我们以极其苛刻的要求控制产品的质量，坚持生物科学研究与世界同步的理念。因此也得到了全国各大医院院校、研究所，科研机构等单位的一致认可，并发表了多篇文献。